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淺談血清培養(yǎng)基的劣勢(shì)及潛在風(fēng)險(xiǎn)

更新時(shí)間:2019-03-04  |  點(diǎn)擊率:1864

疫苗的作用主要是預(yù)防傳染性疾病、新型流行病及暴發(fā)流行,尤其如乙型肝炎呈世界流行,是性的健康問(wèn)題。健康人群是主要的接種對(duì)象,因此,保證疫苗的質(zhì)量和安全性是重要的問(wèn)題,其關(guān)鍵在于做好生產(chǎn)方式和過(guò)程的把關(guān),保證生產(chǎn)用原材料的安全和質(zhì)量。在疫苗生產(chǎn)過(guò)程中,為了獲得高滴度高質(zhì)量的病毒培養(yǎng)液,需要高密度的培養(yǎng)細(xì)胞基質(zhì)。

 

 

細(xì)胞高密度培養(yǎng)主要從培養(yǎng)基著手,通過(guò)補(bǔ)充某些營(yíng)養(yǎng)添加因子優(yōu)化培養(yǎng)基促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。常用的添加因子是牛血清,它能夠提供給Vero細(xì)胞在體外貼附培養(yǎng)的必需物質(zhì),如貼壁因子、生長(zhǎng)因子、激素、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在體外模擬穩(wěn)定的環(huán)境,促進(jìn)細(xì)胞高密度生長(zhǎng)。但是血清是成分復(fù)雜的混合物,其所含的組分不*明確,因此,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中血清的使用存在諸多的缺點(diǎn)和風(fēng)險(xiǎn)。

 

,使用血清較大的風(fēng)險(xiǎn)是向疫苗產(chǎn)品中引入血源性病原生物污染的潛能,從而影響疫苗的生產(chǎn)工藝和安全問(wèn)題;

 

第二,牛血清對(duì)細(xì)胞具有毒性作用和抑制作用,牛血清的成分復(fù)雜,在給細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)的同時(shí)會(huì)負(fù)向影響Vero細(xì)胞在微載體表面的貼附效果。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,培養(yǎng)基添加的牛血清白蛋白易吸附在微載體表面,使細(xì)胞在微載體表面的貼附率明顯下降;

 

第三,血清在質(zhì)量上存在很大的批間差異,增加了疫苗生產(chǎn)工藝的不穩(wěn)定性和疫苗質(zhì)量控制的難度,從而影響疫苗的質(zhì)量;

 

第四,血清價(jià)格昂貴,增加了生產(chǎn)工藝規(guī)?;糯蟮某杀?;

 

第五,血清所含的多種雜質(zhì)如蛋白、激素、多肽、細(xì)胞因子等給疫苗生產(chǎn)的后續(xù)純化工藝增加了困難。

 

血清的這些不利因素促使動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基取代傳統(tǒng)的牛血清培養(yǎng)基已成為病毒性疫苗生產(chǎn)的一個(gè)重要發(fā)展趨勢(shì)。

 

Vero細(xì)胞是疫苗生產(chǎn)的常用細(xì)胞,常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基有M199、DMEM和F12等,締一生物為您介紹一款適用于Vero細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基,由上HiMedia公司生產(chǎn)的M199的改良款——SFRE199-1和SFRE199-2。

 

SFRE-199系列將M199標(biāo)準(zhǔn)配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細(xì)胞生長(zhǎng)而未表現(xiàn)出毒性。

 

另外,SFRE-199系列還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較,細(xì)胞生長(zhǎng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天單層細(xì)胞達(dá)到充分融合。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。

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