織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。

德國(guó)MB公司qPCR支原體檢測(cè)試，該試劑盒采用熒光定量PCR技術(shù)，是已建立的檢測(cè)方法，能一次檢測(cè)歐洲藥典（EP2.6.7）和日本藥典（JP G3）提到的所有支原體物種，并且能與大多數(shù)儀器配合使用。

 

該試劑盒針對(duì)支原體基因組中的高度保守區(qū)，具有快速、耐用和靈敏的特點(diǎn)。

該試劑盒的設(shè)計(jì)滿足歐洲藥典和日本藥典對(duì)于不同類(lèi)型樣本（如軟骨細(xì)胞、血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清）在DNA抽提后的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)?？芍苯訖z測(cè)細(xì)胞上清（研究領(lǐng)域），或者先對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物富集，或先抽提DNA。該試劑盒*符合EP2.6.7和JP G3的要求。

檢測(cè)原理：

該試劑盒擴(kuò)增柔膜體對(duì)應(yīng)的16S rRNA上的特異序列， 而真核細(xì)胞和其他細(xì)菌DNA不會(huì)被擴(kuò)增。

試劑盒說(shuō)明書(shū)同時(shí)包括細(xì)胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程，包括對(duì)DNA抽提和對(duì)樣本體積的規(guī)定。整個(gè)檢測(cè)小于3小時(shí)。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是，無(wú)須活支原體。和一些生化和細(xì)胞學(xué)方法相比，PCR具有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。

試劑盒包含所有必要的PCR組分，

內(nèi)控DNA可用于鑒定PCR抑制或DNA抽提問(wèn)題帶來(lái)的假陰性。內(nèi)控DNA可直接加到PCR預(yù)混液里，或加到DNA抽提之前的樣本中。它可用于驗(yàn)證DNA抽提和qPCR擴(kuò)增過(guò)程。它可從Minerva廠家購(gòu)買(mǎi)（貨號(hào)11-9905）。內(nèi)控對(duì)照的擴(kuò)增結(jié)果在560nm檢測(cè)（HEX通道），而支原體的擴(kuò)增在520nm檢測(cè)（FAM通道）。

試劑盒包括dUTP，它替代dTTP，方便用尿嘧啶DNA糖基酶（UNG）監(jiān)視假陽(yáng)性。該試劑盒不包含UNG。