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高效擴(kuò)增和Crispr-Cas9介導(dǎo)的基因校正治療遺傳性肝病

更新時(shí)間:2024-10-03  |  點(diǎn)擊率:701

20245月,《Cell Stem Cell》上發(fā)表論文:

Efficient expansion and CRISPR-Cas9-mediated gene correction of patient-derived hepatocytes for treatment of inherited liver diseases"

 

“患者源性肝細(xì)胞的高效擴(kuò)增和Crispr-Cas9介導(dǎo)的基因校正治療遺傳性肝病"

 

摘要:

在實(shí)體器官,特別是肝臟中進(jìn)行基于細(xì)胞的體外基因治療,在技術(shù)上具有挑戰(zhàn)性。在這里,我們報(bào)告了肝細(xì)胞治療臨床應(yīng)用的可行策略。我們首先通過大規(guī)模擴(kuò)增患者源性肝細(xì)胞獲得了高質(zhì)量的自體肝細(xì)胞。此外,增殖的患者源性肝細(xì)胞與通過篩選鑒定的AAV2.7m8變體一起,有效地實(shí)現(xiàn)了Crispr-Cas9介導(dǎo)的靶向整合,實(shí)現(xiàn)了FAHOTC致病性突變的功能糾正。重要的是,這些經(jīng)過編輯的肝細(xì)胞以高水平重新填充受傷小鼠的肝臟并經(jīng)歷成熟,成功地治療了移植后酪氨酸血癥小鼠。我們的研究結(jié)合了患者來源的可移植肝細(xì)胞的體外大規(guī)模細(xì)胞擴(kuò)增和基因編輯,具有治療人類肝臟疾病的潛力。

 

在該研究中,對(duì)L-Wnt3a細(xì)胞系的體外培養(yǎng),用到了Ausbian進(jìn)口胎牛血清。


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